超声细胞裂解技术
超声细胞裂解利用空化效应,超声处理器发出20-25kHz高频声波,使细胞悬液产生交替的高低压区域,气泡在低压区形成长大,在高压区崩塌,产生高温、高压与强剪切力,破坏细胞膜。此外,超声波的机械振动也直接作用于细胞,促进裂解。
贴壁细胞需用胰蛋白酶处理后离心收集,悬浮细胞可直接离心,随后将细胞重悬于合适缓冲液中,维持渗透压与pH,保护生物分子活性。将装有细胞悬液的容器置于探头下方,调整探头浸入深度,设定功率、时间、脉冲模式等参数。
超声细胞裂解高效,能在短时间内处理大量样本;适用性广,对原核、真核细胞均有效;可控性强,可精准调整裂解程度。单次处理样本量小,应对大规模需求需多次操作;超声过程易产热,导致生物分子变性;高质量超声处理器价格昂贵,增加实验室成本。
获取细胞内蛋白质,用于分离、鉴定与定量分析,探究细胞生理功能和疾病机制。
从细菌或酵母细胞中提取质粒脱氧核糖核酸,为基因克隆、表达等实验提供材料。
未来,超声处理器将向智能化发展,自动优化参数;结合微流控技术,实现微量样本的高效裂解与分析;与其他新型细胞裂解技术融合,为生命科学研究提供更强大的支持。